O câncer colorretal (CRC) é uma das principais causas de mortes relacionadas ao câncer em todo o mundo. O padrão atual de tratamento para pacientes pode envolver cirurgia, quimioterapia e inibidores do ponto de controle imunológico (ICIs), mas essas abordagens geralmente falham em garantir respostas duradouras contra doenças em estágio avançado. O regorafenibe (REG) é um inibidor de tirosina quinase aprovado pela FDA com propriedades imunomoduladoras para pacientes com CRC que progridem no tratamento padrão, mas as taxas de sobrevida relativa de 5 anos para indivíduos que receberam o medicamento em monoterapia são baixas. Nossa hipótese é que o REG pode ser aproveitado de forma mais adequada junto com agentes imunoterapêuticos que estimulam especificamente a infiltração e ativação de células T no microambiente tumoral (TME). Projetamos um anticorpo biespecífico PD-L1/CD3 (BSaB) que se liga simultaneamente às células CRC que expressam PD-L1 e estimula as células T ativadas para investigar estratégias de combinação com REG em modelos pré-clínicos de CRC. A terapia combinada de REG + BsAb iniciou e sustentou com segurança a inibição contra a progressão de MC38 e CT26 in vivo, e esses efeitos se correlacionaram com a melhora da infiltração e atividade de células T CD8+ em um TME propenso ao tipo 1. Além disso, células T CD8+ citotóxicas de camundongos sensibilizados com REG + BSAB exibiram maior reatividade das células tumorais em comparação com animais tratados apenas com qualquer um dos agentes. Portanto, os benefícios imunomoduladores do REG podem ser efetivamente combinados com um BsAb que se ancora às células CRC, diminui a imunossupressão (por meio do bloqueio de PD-L1) e ativa/sustenta as células T CD8+específicas do antígeno dentro do TME. Nosso regime REG + BSAb recém-descrito levou a melhores resultados antitumorais pré-clínicos e pode representar uma abordagem futura promissora para pacientes com CRC.