Os receptores acoplados à proteína G (GPCRs) desempenham papéis fundamentais na sinalização celular e representam alvos de drogas proeminentes. A elucidação estrutural dos GPCRs é crucial para os esforços de descoberta de medicamentos. No entanto, os estudos estruturais dos GPCRs continuam desafiadores, particularmente para estruturas de estado inativo, que geralmente requerem extensa engenharia de proteínas. Aqui, apresentamos uma nova estratégia de design denominada “fusão por clique” para gerar proteínas de fusão para facilitar os estudos estruturais do GPCR. Nosso método envolve o design racional de domínios proteicos estruturalmente estáveis rigidamente ligados aos GPCRs. A proteína de fusão resultante aumenta a termoestabilidade do alvo GPCR e auxilia na determinação das estruturas do GPCR por meio de microscopia crioeletrônica (Crio-EM). Demonstramos ainda que a proteína de fusão projetada pode ser transferida entre GPCRs estruturalmente semelhantes a pequenas configurações na região ligante. Nosso estudo apresenta uma abordagem promissora para facilitar os estudos estruturais do GPCR e promover os esforços de descoberta de medicamentos.

Palavras-chave: GPCR; estrutura crio-EM; design de proteínas.