As enzimas CRISPR-Cas devem reconhecer um motivo adjacente ao protoespaçador (PAM) para editar um sítio genômico, limitando muito a gama de sequências direcionáveis em um genoma. Embora existam estratégias de engenharia para alterar a especificidade do PAM, elas normalmente exigem experimentação iterativa e trabalhosa.