O componente de DNA dos estados extracelulares de neutrófilos (NET-DNA) está associado à metástase do câncer e à resistência à quimioterapia. No entanto, estudos recentes sugeriram que o NET-DNA contribui para a ativação das células dendríticas (DCs) e promove a resposta imune inata à imunidade anticâncer. Portanto, explorar abordagens terapêuticas para inibir a progressão tumoral mediada por NET e, ao mesmo tempo, manter a imunidade antitumoral é essencial. Nossos grupos identificaram recentemente o CCDC25 como um sensor NET-DNA específico na membrana citoplasmática das células cancerosas que promove a metástase do câncer. Neste estudo, realizamos a triagem de compostos de moléculas pequenas e revelamos que a mitoxantrona (MTO) poderia bloquear a interação entre o NET-DNA e o CCDC25. Os resultados do docking molecular indicaram que o MTO competiu com o NET-DNA ligando-se aos resíduos de aminoácidos Tyr²⁴ (Y24), glu²⁵ (E25) e asp²⁸ (D28)) da estrutura cristalina do CCDC25. Mais importante ainda, conjugamos o MTO com ácidos palmitoleicos, como o Di-PAL-MTO, para aumentar seu tempo de residência na membrana citoplasmática, o que aumentou sua eficiência inibitória e diminuiu sua citotoxicidade. Além disso, o Di-PAL-MTO inibiu marcadamente a cascata RAC1-CDC42 para aliviar o arranjo do citoesqueleto induzido por NET e a migração quimiotática das células cancerosas. Em vários modelos de camundongos, o Di-PAL-MTO pode suprimir a metástase do câncer de mama e ter efeitos sinérgicos com quimioterápicos. Além disso, o Di-PAL-MTO promove a ativação de DC dependente de Net-DNA, levando à expressão subsequente de várias quimiocinas que facilitam a infiltração das células T CD8⁺. No geral, identificamos com sucesso um inibidor de pequena molécula, o Di-PAL-MTO, com efeitos duplos na repressão tumoral e na resposta imune antitumoral, que fornece uma nova estratégia terapêutica contra o câncer de mama.

Palavras-chave: Imunidade antitumoral; CCDC25; NET-DNA; inibidor de moléculas pequenas; Metástase tumoral.