Objetivos: As estratégias terapêuticas atuais para o adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) têm eficácia limitada no aumento das taxas de sobrevida dos pacientes, em grande parte devido à resistência à ferroptose e imunossupressão. O objetivo deste estudo é identificar mecanismos moleculares associados à resistência à ferroptose e imunossupressão em células tumorais PDAC.
Métodos: O sequenciamento circular de RNA (circRNA-seq) foi realizado em amostras clínicas para identificar potenciais circRNAs que oferecem resistência à ferroptose. A coloração C11-BODIPY, a coloração ferroOrange, a proporção de glutationa, a quantificação do malondialdeído e a microscopia eletrônica de transmissão foram empregadas para avaliar a ferroptose. Ensaios de extração de RNA, espectrometria de massa, imunoprecipitação de RNA e coimunoprecipitação foram conduzidos para investigar os mecanismos moleculares envolvidos. Um modelo de tumor de xenoenxerto de camundongo HunSG foi usado para validar agentes terapêuticos.
Resultados: Um circRNA derivado de TRIP12 (Ctrip12) foi identificado em amostras de PDAC resistentes à ferroptose. O knockdown Ctrip12 aumentou a sensibilidade das células PDAC à ferroptose e imunoterapia. Estudos mecanísticos subsequentes revelaram que o Ctrip12 se liga especificamente à proteína N-acetilglucosamina transferase (OGT) ligada ao O e aumenta os níveis de O-GlcNacilação intracelular, levando ao aumento dos níveis de proteína da cadeia pesada de ferritina (FTH) e PD-L1 nas células tumorais. Notavelmente, a alta expressão de Ctrip12 suprimiu a sensibilidade à ferroptose e aumentou a resistência imune em células PDAC, funcionando como um arcabouço proteico por meio de sua interação com OGT e proteína quinase do retículo endoplasmático semelhante a R (PERK). A inibição de cTRIP12 induziu a ferroptose em células PDAC para reduzir a expressão de FTH e PD-L1 e aumentou sinergicamente a eficácia da imunoterapia. Experimentos in vivo com animais confirmaram que a terapia tripla consistindo em GSK2656157, erastina e anti-CTLA-4 suprimiu efetivamente a progressão do PDAC em tumores com alta expressão de cTRIP12.
Conclusão: Elucidamos os mecanismos moleculares subjacentes à ocorrência simultânea de resistência à ferroptose e imunossupressão em pacientes com PDAC. Nosso estudo fornece uma nova estratégia terapêutica que pode promover a ferroptose em células tumorais e aumentar a eficácia da imunoterapia.
Palavras-chave: RNA circular; Ferroptose; Imunoterapia; O-GlcNacilation; Adenocarcinoma ductal pancreático.
