A integridade da membrana plasmática é vital para quase todos os aspectos do funcionamento celular¹. Forças mecânicas podem causar danos à membrana plasmática², mas não se sabe se existem moléculas grandes que regulam a integridade da membrana plasmática sob tensão mecânica. Aqui, construímos um sistema de estiramento celular de 384 poços que fornece cepas precisas e reproduzíveis para células cultivadas. Usando o sistema, examinamos 10.843 siRNAs direcionados a 2.726 proteínas transmembranares de passagem múltipla para alterações de permeabilidade de membrana induzidas por cepas. A triagem identificou NINJ1, uma proteína recentemente proposta para regular a piroptose e a morte de outras células líticas, como a mais atingida. Demonstramos que o NINJ1 é um regulador crítico para a ruptura mecânica da membrana plasmática induzida por deformação (PMR), sem a necessidade de estimular nenhum programa de morte celular. O nível de NINJ1 na membrana plasmática está inversamente relacionado à quantidade de força necessária para romper a membrana. No contexto da piroptose, o NINJ1 por si só não é suficiente para romper totalmente a membrana, e força mecânica adicional é necessária para o PMR completo. Nosso trabalho estabelece que o NINJ1 funciona como um determinante genuíno das propriedades biomecânicas da membrana. Nosso estudo também sugere que o PMR em tecidos de microambientes mecânicos distintos é submetido a um ajuste fino por diferenças na expressão de NINJ1 e forças externas.