A leucemia linfoblástica aguda de células T (T-ALL) é uma neoplasia maligna agressiva caracterizada por altas taxas de falha na indução e recidiva, e faltam imunoterapias direcionadas eficazes. Apesar do progresso clínico promissor com células CAR-T dirigidas por CD7 editadas pelo genoma, que apresentam questões logísticas e regulatórias significativas, a terapia com células CAR-T em T-ALL permanece desafiadora devido à expressão compartilhada de antígenos entre células T malignas e saudáveis. Isso pode resultar em fratricídio das células CAR-T, aplasia das células T e o potencial de contaminação por explosão durante a fabricação das células CAR-T. As células CAR-T descritas recentemente têm como alvo antígenos não pan-T, ausentes em células T saudáveis, mas expressas em subconjuntos específicos de T-ALL. Esses antígenos incluem CD1a (NCT05679895), que é expresso em T-ALL cortical, e CCR9. Mostramos que o CCR9 é expresso em > 70% dos pacientes com T-ALL (132/180) e é mantido na recidiva, com um perfil de expressão seguro em tecidos hematopoiéticos e não hematopoiéticos saudáveis. Análises posteriores mostraram que o direcionamento duplo de CCR9 e CD1a poderia beneficiar pacientes com T-ALL com uma cobertura blástica maior do que tratamentos com células CAR-T únicas. Portanto, desenvolvemos, caracterizamos e validamos pré-clinicamente um novo CAR humanizado específico para CCR9 com atividade antileucêmica robusta e específica como monoterapia in vitro e in vivo contra linhas celulares, amostras primárias de T-ALL e xenoenxertos derivados de pacientes. É importante ressaltar que as células CAR-T de duplo alvo CCR9/CD1a mostraram maior eficácia do que as células CAR-T de alvo único, particularmente em casos de T-ALL com populações leucêmicas fenotipicamente heterogêneas. A terapia dupla com CAR-T CD1a/CCR9 pode prevenir a aplasia de células T e evitar a necessidade de transplante alogênico e abordagens de engenharia genômica que desafiam a regulamentação em T-ALL.