A manutenção do H3K9me3 envolve o reconhecimento de modificações pré-existentes pelo HP1, que recorre à metiltransferase SUV39H1 para metilar as histonas adjacentes recém-incorporadas, estabelecendo assim um ciclo de feedback positivo. No entanto, como esse feedback positivo é restrito para manter a homeostase do H3K9me3 permanece amplamente desconhecido. Aqui, realizamos uma triagem CRISPR-Cas9 imparcial em escala de genoma e identificamos a ligase de ubiquitina CUL5^ASB7 E3 como um regulador negativo de H3K9me3. O ASB7 é recrutado para heterocromatina pelo HP1 e promove a degradação do SUV39H1. Durante a mitose, o CDK1 fosforila o ASB7, impedindo sua interação com o SUV39H1, levando à estabilização do SUV39H1 e à restauração do H3K9me3. Nossas descobertas revelam um circuito dinâmico envolvendo HP1, SUV39H1 e ASB7 que governa a homeostase do H3K9me3, garantindo assim uma herança epigenética fiel e prevenindo a formação excessiva de heterocromatina.