Antecedentes: As vacinas de subunidades proteicas têm um forte histórico de eficácia e segurança e têm sido amplamente aplicadas na prevenção de uma variedade de doenças infecciosas. Os impactos das modificações pós-traducionais dos antígenos vacinais são frequentemente negligenciados, apesar do fato de que podem variar significativamente dependendo dos hospedeiros de expressão (por exemplo, bactérias, leveduras, plantas, insetos ou células de mamíferos) e das condições de cultura usadas para sua fabricação.
Métodos: Usando trímeros de pico SARS-CoV-2 como antígenos modelo, buscamos avaliar o impacto imunológico da modulação de seu estado de glicosilação. Proteínas de pico ricas em glicanos ligados a N do tipo complexo (CT), com alto teor de manose (HM) ou paucimanose (PM) foram produzidas usando células de ovário de hamster chinês (CHO) (cultivadas com ou sem o inibidor da manosidase kifunensina) ou células de insetos.
Resultados: Aqui, mostramos que quando esses antígenos são adjuvados com lipossomas compostos de lactosil arqueol sulfatado (SLA), todas as glicoformas são altamente imunogênicas e induzem abundantes células T produtoras de IgG e IFN-γ série específica de pico na mulher Camundongos C57BL/6. O antígeno de pico com glicanos CT induz uma resposta imune neutralizante significativamente mais potente, que se correlaciona diretamente com uma IgG específica do domínio de ligação ao receptor (RBD) mais abundante quando comparada ao antígeno com glicanos HM. Esta observação permanece verdadeira se o pico for trimerizado por resistina ou por dobra de T4, indicando que o efeito de glicosilação não é específico do domínio de trimerização. O pico com glicanos PM induz títulos notavelmente baixos de anticorpos neutralizantes e IgG específicos para RBD.
Conclusões: Os resultados destacam os impactos significativos do perfil de glicosilação do antígeno de uma vacina no direcionamento da resposta imune, o que deve ser uma consideração importante para o desenvolvimento de vacinas eficientes baseadas em proteínas.
